Ako vybrať správny stĺpec?

? ? ? ? ? ? ? ?

Date:2021-11-04 17:32:46 Thursday

Summary: ① Matrica balenia chromatografickej kolóny A. Silikagélová matrica: vysoká čistota, nízka cena, vysoká pevnosť, ľahká chemická modifikácia, ale rozsah pH je obmedzený. Väčšina kremičitých matricových plnív je stabilná medzi pH 2-8, ale špeciál......

① Matrica balenia chromatografickej kolóny
A. Silikagélová matrica: vysoká čistota, nízka cena, vysoká pevnosť, ľahká chemická modifikácia, ale rozsah pH je obmedzený. Väčšina kremičitých matricových plnív je stabilná medzi pH 2-8, ale špeciálne modifikovaná fáza viazaná silikagélom môže byť stabilizovaná pri pH 1,5-10.
B. Polymérna matrica: široký rozsah použitia pH, stabilná teplota (vysoká teplota môže dosiahnuť viac ako 80 stupňov) a nízka mechanická pevnosť.
② Tvar častíc
Väčšina moderných HPLC plnív sú sférické častice, ale niekedy nepravidelné častice. Sférické častice poskytujú nižší tlak v kolóne, vyššiu účinnosť a stabilitu kolóny a dlhšiu životnosť kolóny. Pri použití aktívnej fázy s vysokou viskozitou; nepravidelné častice majú väčší špecifický povrch a relatívne nízku cenu.
③Veľkosť častíc
Čím menšia je veľkosť častíc, tým vyššia je účinnosť a vyššie rozlíšenie, ale zároveň to povedie k vyššiemu poklesu tlaku v kolóne. Vyberte si 1,5-3μm baliaci materiál na vyriešenie niektorých zložitých vzoriek, UPLC môže použiť 1,5μm balenie; ďalšia náplň s veľkosťou častíc 10 μm alebo väčšou sa používa ako semipreparatívna alebo preparatívna kolóna.
④ Obsah uhlíka
Obsah uhlíka v chromatografickej kolóne sa vzťahuje na pomer naviazanej fázy na povrchu silikagélu, ktorý súvisí so špecifickým povrchom a pokrytím väzby. Vysoký obsah uhlíka zlepšuje kapacitu kolóny, rozlíšenie a čas analýzy a používa sa pre zložité vzorky, ktoré vyžadujú vysoké rozlíšenie; nízky obsah uhlíka má krátky čas analýzy a vykazuje rôznu selektivitu a používa sa na rýchlu analýzu jednoduchých vzoriek a aktívnych fáz s vysokým obsahom vody. Vzorky stavu. Vo všeobecnosti sa obsah uhlíka C18 pohybuje od 7 do 19 %.
⑤ Veľkosť pórov a špecifický povrch
Adsorpčné médium HPLC sú porézne častice a väčšina reakčného povrchu je v póroch. Preto musia molekuly vstúpiť do pórov, aby sa adsorbovali a oddelili.
Veľkosť pórov v chromatografickej kolóne a špecifický povrch sú dva komplementárne pojmy. Veľkosť pórov je malá a špecifický povrch je veľký a naopak. Veľký špecifický povrch, zvyšuje reakciu medzi vzorkou a viazanou fázou, zvyšuje skladovanie, zaťaženie vzorky a separáciu zložitých zložiek; malý špecifický povrch, rýchly ekvilibračný čas, vhodný pre gradientovú analýzu.
⑥ Objem pórov a mechanická pevnosť
objem pórov, tiež známy ako "objem pórov". Vzťahuje sa na veľkosť prázdneho objemu na časticu. Môže dobre odrážať mechanickú pevnosť plniva. Plnivá s veľkým objemom pórov majú o niečo slabšiu mechanickú pevnosť ako plnivá s malým objemom pórov. Plnivá s objemom pórov 1,5 ml/g alebo menej sa väčšinou používajú na HPLC separáciu, zatiaľ čo plnivá s objemom pórov väčším ako 1,5 ml/g sa používajú na vylučovaciu chromatografiu a nízkotlakovú chromatografiu.
⑦ koncový uzáver
Zakrytie konca kolóny môže znížiť koncové vrcholy polárnych bázických zlúčenín v dôsledku interakcie s exponovanými silanolovými skupinami. Neblokovaná viazaná fáza bude mať inú selektivitu v porovnaní s blokovanou viazanou fázou, najmä pre polárne vzorky.